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電轉(zhuǎn)儀celetrix

產(chǎn)品簡介

電轉(zhuǎn)儀celetrix以及相關的電擊管與電轉(zhuǎn)液綜合優(yōu)化了儀器電學特性、 電擊管內(nèi)的電場均勻度以及電轉(zhuǎn)液的細胞保護作用,是獲得高效、 低 毒性細胞電轉(zhuǎn)的解決方案。

更新時間:2024-10-08
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電轉(zhuǎn)儀celetrix

細胞電轉(zhuǎn)染(電轉(zhuǎn)),也叫細胞電穿孔(electroporation), 是把外源大分子物質(zhì)DNA、 RNA、 siRNA、 蛋白質(zhì)以及一些小分子等導入細胞膜內(nèi)部的重要方法。

在瞬間強大電場的作用下,溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性,帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進入細胞膜。 由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,細胞外部電流場產(chǎn)生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受,細胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計,細胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒有電流,因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過程中細胞毒性很小。 電場使DNA等物質(zhì)進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近,隨后細胞本身的機制可以允許這些物質(zhì)到細胞核等處。

普通電轉(zhuǎn)能量過高可導致部分細胞因膜破壞而死亡,其中能存活下來的細胞內(nèi)部都不會受到電流影響,因為細胞膜完整是細胞存活的必要條件。

由千電轉(zhuǎn)技術依靠的是物理方法,細胞表面的分子特性對電轉(zhuǎn)影響比較小。 相比化學轉(zhuǎn)染方法和病毒載體轉(zhuǎn)染方法,電轉(zhuǎn)可以用在所有的細 胞種類上,而且容易定量控制。

 

 

以及相關的電擊管與電轉(zhuǎn)液綜合優(yōu)化了儀器電學特性、 電擊管內(nèi)的電場均勻度以及電轉(zhuǎn)液的細胞保護作用,是獲得高效、 低毒性細胞電轉(zhuǎn)的解決方案。

 

celetrix電轉(zhuǎn)儀應用:

•     有效的細胞:幾乎所有的真核細胞,包括所有細胞系,原代細胞,干細胞,血液和免疫類細胞,神經(jīng)細胞,植物細胞和胚胎。

•     可以電轉(zhuǎn)的物質(zhì)包括DNA、 RNA、 siRNA、 蛋白質(zhì)等。

•     適用實驗:瞬時或穩(wěn)定表達蛋白質(zhì)、 基因敲除與敲入、 siRNA和其他分子機制研究。

•     科研領域:細胞分子生物學、 免疫學、 血液學、 神經(jīng)學、 癌癥研究、 新藥開發(fā)等。

 

功能強大   操作簡單

效率高       細胞死亡率低

適用所有真核細胞;可以電轉(zhuǎn)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等;
外觀美觀、界面簡潔、操作簡單。
電脈沖參數(shù)設定方便,內(nèi)部電路反應迅速,設定完成即可啟動,瞬間完成電轉(zhuǎn)。
示波器功能,顯示實際通過樣品的電流波形,可視化掌控實驗質(zhì)量。
LED照明燈,清楚指示電擊管連接狀態(tài)。
功率強大,單次高效電轉(zhuǎn)可達1000ul,可以經(jīng)濟快速的電轉(zhuǎn)大量細胞。

 

全部過程只需5
1、懸浮細胞(貼壁細胞先消化成單細胞狀態(tài))1000rpm離心3min
2、無血清細胞培養(yǎng)液洗一遍、1000rpm離心1min
3、重懸細胞在電轉(zhuǎn)液中,加入DNA,將細胞轉(zhuǎn)移至電擊管蓋好并放入儀器中。
4、設定參數(shù)進行電擊,大部分細胞系可以使用30ms單脈沖,只需改變一個電壓參數(shù)。
5、取出細胞進行培養(yǎng)。

技術參數(shù)

 

儀器型號

 

LE款

 

EX款

 

體積使用范圍

 

20ul~200ul

 

20ul~1000ul

 

常用細胞量

 

20ul

 

0.2×106~2×106

 

0.2×106~2×106

 

120ul

 

1.2×106~1.2×107

 

1.2×106~1.2×107

 

200ul

 

2×106~2×107

 

2×106~2×107

 

600ul

 

 

6×106~6×107

 

1000ul

 

 

1×107~1×108

 

電轉(zhuǎn)脈沖電壓

 

300V-1500V

 

300V-1500V

 

 

celetrix電轉(zhuǎn)儀應用的優(yōu)勢:

Celetrix新一代電轉(zhuǎn)可以高效轉(zhuǎn)染從新鮮PBMC到刺激培養(yǎng)階段的T細胞。 與其他電轉(zhuǎn)技術相比, Celetrix電轉(zhuǎn)技術具有效率。

我們的技術也具有細胞存活率,并且細胞在電轉(zhuǎn)后能夠和未電轉(zhuǎn)細胞

Celetrix電轉(zhuǎn)儀使得CAR-T, TCR-T制備、 CRISPR介導的基因編輯等變得容易。

 

目前70%以上的治療性抗體蛋白都是由CHO細胞產(chǎn)生

的,Celetrix電轉(zhuǎn)技術對CHO細胞可以達到高效穩(wěn)定

(90%以上)的電轉(zhuǎn)效率和80%以上的存活率, 為治療 性抗體細胞轉(zhuǎn)染領域提供了更加高效、便捷、 穩(wěn)定的轉(zhuǎn) 染方法。

 

利用Celetrix的電轉(zhuǎn)技術電轉(zhuǎn)Cas9蛋白和gRNA (+)或者Cas9蛋白,通過T7El核酸內(nèi)切酶檢測基因編輯效率,在APP, AAVSl, OCT4和PDCDl四個基因位點的編輯效率均超過50%, 其中AAVSl基因位點編輯效率能夠達到70%。

 

•     電極杯中樣品與電極接觸面積大,電化學反應產(chǎn)生毒性物質(zhì)多,并且產(chǎn)生非常多的氣泡。 氣泡對電轉(zhuǎn)的實際影響非常大。

•     由千氣泡是絕緣體,電流只能從氣泡之間的間隙溶液流過,這樣導致氣泡間隙的溶液中電流富集升高,處千其中的細胞因承受太高的電壓而死亡。

電極杯內(nèi)的溶液上方受到液面效應影響,電場不均勻。 靠近兩個電極1-2mm的區(qū)域由千氣泡的作用,電場也不均勻。電極杯內(nèi)電場比較均勻的較優(yōu)電轉(zhuǎn)區(qū)域很小(右圖藍色部分),而1mm或者

2mm的電極杯甚至可能沒有較優(yōu)電轉(zhuǎn) 區(qū)域。

液體樣品密封呈規(guī)整圓柱形,沒有液面效應影響電場均勻度。

電極與液體接觸面積小,氣泡少又而且被壓縮,不影響電流分配。

電擊管內(nèi)部電場均勻,全部都是有效電轉(zhuǎn) 區(qū)域。

 

 

 

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